PCR試劑盒六大使用事項請知悉！

　　1.保存

　　未拆封的試劑盒，請于-20℃保存；拆封之后，應在4℃保存。在試劑消耗量較少的實驗室，可以考慮將試劑盒的按照組分單獨分裝，后保存在-20℃。

　　2.配置

　　PCR試劑盒內所含各組份都是混合物，在靜置情況下會發(fā)生分層現(xiàn)象，因此試劑盒現(xiàn)配現(xiàn)用，震蕩混勻，避免反復凍融，避免預混。其中，反復凍融將大幅縮短試劑盒使用壽命。

　　在擴增體系的選擇時，盡量選擇標準體系，再根據(jù)檢材情況加入模板，之后切勿忘記以PCR用水補足擴增體系。

　　3.切勿預混

　　因試劑盒中酶的活性較高，將各組份按照比例混合之后，即使沒有達到它的適溫度，但也可能發(fā)生與引物結合，導致實驗結果出現(xiàn)丟位點或者雜合子純化等情況。

　　4.陰陽性參照

　　實驗結果會受提取、擴增和電泳等多個環(huán)節(jié)的影響，因此，每次擴增實驗都應該添加一組陰陽性參照。這樣，當結果異常的時，我們就可以結合陰陽性參照的表現(xiàn)，排查問題出在哪個環(huán)節(jié)。

　　5.陽性參照是否通用

　　雖然多數(shù)試劑盒的陽性參照都是007，但是案件試劑盒和建庫試劑盒的陽性參照濃度不同，通常來說案件試劑盒的濃度更低，擴增時需選用試劑盒相對應的陽性參照。

　　6.擴增程序

　　擴增程序能夠將試劑盒大效能發(fā)揮出來而設計，切勿隨意更改；再者，不同試劑盒所含酶的升溫模式也有不同，因此，在設置擴增程序時，要選擇對應的升溫模式。