大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標板上；分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本，標準品和樣本中的大鼠IL-4會與酶標板上的包被抗體充分結合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體，該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標準品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結合；洗板后加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強度的非共價結合；洗板后加入顯色劑底物TMB，若反應孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4，則HRP會使無色TMB變成不同深淺（正相關）的藍色物質，加入終止液后反應孔會變成黃色；在2max=450nm（OD=450nm）處測定反應孔樣品吸光度（OD），樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比，通過繪制標準曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中大鼠IL-4的濃度。

　　大鼠elisa試劑盒注意事項：

　　1.試劑盒應在有效期內使用，請不要使用過期的試劑。

　　2.試劑盒未使用時應保存在2-8℃冰箱，已復溶但未用完的標準品，請丟棄。

　　3.試劑盒使用前請在室溫恢復30min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。

　　4.在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測，且加入試劑的順序應保持一致。

　　5.為避免交叉污染，請在試驗中使用1次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。

　　6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10S即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。

　　7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。

　　8.為保證結果準確，每次檢測均需做標準曲線。